共转染造句

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另外，通过共转染和筛选纯化获得了携带appa基因的重组家蚕杆状病毒。
为解决这个问题，我们构建tpcdna3llmyc rp1gap和pmtz ha raplgap重组质粒，将其共转染入ai4细胞。
在实验中同时共转染人集缩素smc亚基hcap一e和hcap一c特异的rnai质粒rhe和rhc和pcdna3 . 1 + kg到hela细胞。
此外，为了得到可溶性重组eo蛋白并便于观察重组蛋白的表达情况，我们将egfp基因与eo基因相连插入昆虫杆状病毒转移载体中，与线性杆状病毒dna共转染sf9细胞后通过噬斑纯化得到纯的重组杆状病毒，将其感染sf9细胞制备p1种子液，同时用荧光显微镜观察绿色荧光蛋白的表达情况剔除表达效果差的重组杆状病毒。再用p1种子液感染sf9细胞制备高效价的p2种子液。通过病毒液的梯度稀释和噬斑测定，确定p2种子液的病毒滴度达1 . 14 10 ~ 7pfu ml 。
在构建了红色荧光蛋白aes表达载体后，将其与tle绿色荧尤蛋白载体共转染细胞，共聚焦显微镜观察发现这两种分子在胞浆中有共存现象，而且aes的表达可抑制tlei向胞核内的聚积。
本研究采用脂质体转染方法，将含有完整gpvh1分离株vp3基因、报告基因lacz 、禽痘病毒早晚期启动子lp2ep2 、痘苗病毒启动子p7 . 5 、 p11和fpv - 017复制非必须区的转移载体质粒psy681vp3lacz与fpv - 017共转染鸡胚成纤维细胞，经6轮蚀斑克隆、筛选、表达， pcr鉴定和dot - elisa检测，证明该重组病毒已构建成功，并获得了遗传性状稳定的鹅细小病毒vp3基因的重组禽痘病毒。
利用脂质体介导的方法，将pltk - ha与prvbartha - k61基因组共转染于亚单层vero细胞，依据报告基因lacz在细胞中的表达，筛选蓝色蚀斑的重组病毒，经数次蚀斑纯化后， pcr鉴定、 western - blot分析。
共转染hplp细胞，结果表明所有的缺失突变体对cmv启动子都表现抑制活性，我们发现在ie180和p启动子的转录起始位置两侧同时具有两个特征序列（ 5 ’ atffit 3 ’ ）。
这时，存在三种可能的情况，即共转染rhe和pedna3 . 1 * kc 、共转染rhc和pedna3 . 1 + kg 、共转染rhe和rhc和pc洲a3 . 1 + kg ，但都观察到明显的染色质桥现象，进一步证明这种表型是人集缩素中smc亚基的缺陷的特征表型。
首先将质粒ploxgfpdna电转染牛胎儿成纤维细胞，并用g418筛选，筛选出绿色荧光细胞克隆，增殖培养之后，将质粒ploxifn和pbs185dna共转染荧光细胞克隆，筛选出不发光的克隆。
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与报告质粒pcat3 control共转染hela细胞，在pcat3 control中含一个sv40真核启动子带动着一个报告基因? ?绿酶素乙酸转移酶（ chloramphenicolacetyltransferase ， cat ），它在哺乳动物细胞中能表达cat蛋白。
当分别共转染附加kozac序列和核定位信号的gfp与人集缩素smc亚基hcap一e特异的rnai质粒rhe和人集缩素smc亚基hca尸一c的f { nai质粒rhc时，都观察到gfp和hochest33342标记的转染后hela细胞表现多核和染色质桥现象。
为了提高重组导向溶栓分子scfv - uk32的溶纤活性，通过重组pcr方法在编码scfv与uk32的碱基之间引入编码klgggg连接肽的碱基序列，并克隆到转移载体pbacpak9上,通过与线性病毒dna bacpak6 bsu36i digest共转染到昆虫细胞sf 9内，进行表达。表达产物分泌到上清中，共转染后第5d天用纤维平板法测得sf 9细胞上清溶纤活性达到107 iu ml ，比未引入连接肽的scfv - uk32的表达活性25 iu ml高。
纯化该重组质粒并与线性杆状病毒dnabac - n - blue共转染昆虫细胞sr9 ， 5d后收获重组病毒。重组杆状病毒dna分子的pcr及酶切鉴定表明，获得了prv - vp7基因与杆状病毒dna的重组子，命名为a - 1代病毒。
该载体与具有高度感染性的bartha - k61株基因组dna通过脂质体加plus法共转染vero细胞，采用甲基纤维素固定病变， x - gal染色，经过10代蓝斑纯化获得了一株稳定表达lacz基因的ge tk基因缺失突变株，命名为rprv - lacz 。
本研究首先通过pcr将家蚕杆状病毒多角体蛋白起始密码子后的18个碱基引入到hgm - csf基因的5 ’端之前，然后将融合基因重组与家蚕杆状病毒转移载体pbacpak8中，获得重组转移载体pbacpak8 - 6aa - hgm - csf ，并与线性化bm - bacpak6dna共转染家蚕细胞株，获得重组病毒bacpak - 6aa - hgm - csf 。
重组转移载体dna与经bsu36i酶切线性化的修饰型病毒bm - bacpakdna共转染家蚕bmn细胞，两轮空斑筛选和纯化，获得重组病毒rbmbacph - egf ，经pcr扩增、 dna点杂交等方法鉴定证实重组病毒中已正确插入ph - egf融合基因。
本研究首先将人血管抑素( angiostatin )基因重组于家蚕杆状病毒转移载体pbacpak8中，获得重组转移载体pbacpak - angiostatin ，并与线性化病毒bm - bacpak6dna共转染家蚕细胞株，获得重组病毒bacpak - angiostafin 。
我们以往的研究表明，用绿荧光蛋白( gf内在信号肤下游n末端标记nrzb亚单位，与nri共转染时能形成与野生型相似的nmda受体通道，且可以通过抗gfp抗体标记活细胞膜表面表达的nmda受体复合物。
以绿色荧光细胞克隆为模板扩增出了包括gfp基因、 neo基因等在内的约4kb的条带；以共转染后的未经筛选的细胞为模板既扩增出了约1000bp的条带，又扩增出了约4kb和500bp的条带。