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预杂交造句

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  • 如步骤(6)将混合液注入密封塑料袋中,在与预杂交相同温度下杂交6-12小时。
  • 将组织切片浸入预杂交液中可达到封闭非特异性杂交点的目的,从而减低背景染色。
  • 杂交液的成分和预杂交液基本相同,所不同的是加入了标记的核酸探针和硫酸葡聚糖。
  • (3)杂交:首先要进行预杂交,即用非特异的核酸溶液封闭膜上的非特异性结合位点。
  • 2.从水浴中取出含有滤膜和预杂交液的塑料袋,剪开一角,将变性的DNA探针加到预杂交液中。
  • 注:杂交与预杂交的温度可以是55到60度不等,温度越低,探针结合越好,温度越高,背景越小。
  • (6)将滤膜放入含6-10ml预杂交液的密封小塑料袋中,将预杂交液加在袋的底部,前后挤压小袋,使滤膜湿透。
  • ③将湿润NC膜装入塑料袋中,按0.2ml/cm2的量加入预杂交液,尽可能挤出气泡,将袋封口,置68℃水浴1-2小时或过夜。
  • 预杂交液实际上就是不含探针的杂交液,可以自制或从公司购买,不同的杂交液配方相差较大,杂交温度也不同。
  • 转印后的滤膜在预杂交液中温育4-6h,即可加入标记的探针DNA(探针DNA预先经加热变性成为单链DAN分子),即可进行杂交反应。
  • 预杂交造句挺难的,這是一个万能造句的方法
  • 6、剪去杂交袋一角,将预杂交液倒入15或50ml的Falcon试管中,加入约10~20ng/ml(随机引物标记)探针,一般来说,106~107cpm/ml已足够,轻轻混匀。
  • 因为能结合DNA片段的膜同样能够结合探针DNA,在进行杂交前,必须将膜上所有能与DNA结合的位点全部封闭,这就是预杂交的目的。
  • 3.当使用32P标记的Cdna作探针时,可以在预杂交液或杂交液中加入poly(A)RNA以避免探针同真核生物DNA中普遍存在的富含胸腺嘧啶的序列结合。
  • 将滤膜长时间置于高浓度的碱性溶液中,会导致杂交背景明显升高,可通过提高预杂交和杂交步骤中有关阻断试剂的量来予以解决。
  • (4)将滤膜转到盛有150ml预杂交液的玻璃中,在适宜温度(即在水溶液中杂交时用68℃,而在50%甲酰胺中杂交时用42℃)下,预杂交1-2小时。
  • 用未标记的非特异重复序列与标记的DNA探针预杂交,以封闭探针中的非特异重复序列,从而保证探针与染色体上的靶序列特异性杂交。
  • 3、预热预杂交液至42℃,经塑料袋开口处加入0.1ml/cm2的预热的预杂交液,小心移取,避免加入气泡,从塑料袋中挤压出所有气泡,密封塑料袋。
  • 原位杂交技术主要步骤:材料处理及细胞样品的固定;样品的制备和预处理;探针的制备和预杂交;探针及样品的变性;杂交温育;检测杂交信号,进行结果分析。
  • 预杂交的目的是用非特异性DNA分子(鲑精DNA或小牛胸腺DNA)及其它高分子化合物(Denhart’s溶液)将待测核酸分子中的非特异性位点封闭,以避免这些位点与探针的非特异性结合。
  • GENMED-50倍Denhardt溶液(分子生物级)是一种旨在封阻NORTHERN、SOURTHERN、WESTERN、DOT/SLOT、MICROARRAY印迹技术等预杂交和杂交过程中的非特异性结合,帮助印迹实验最大程度地增强特异性杂交水平、敏感度和信噪比。
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